مهاجری, مسعود, شمسیان, سید علی اکبر, رضایی, عبدالرحیم, حسن پور, کاظم, شاکری, محمد تقی, فرنوش, غلامرضا, فتحی مقدم, فرهاد. (1389). شناسایی مولکولی گونه های عامل یل شمانی زو جلدی در شهرستان سبزوار. مجله دانشکده پزشکی دانشگاه علوم پزشکی مشهد, 53(3), 138-144. doi: 10.22038/mjms.2010.5376
مسعود مهاجری; سید علی اکبر شمسیان; عبدالرحیم رضایی; کاظم حسن پور; محمد تقی شاکری; غلامرضا فرنوش; فرهاد فتحی مقدم. "شناسایی مولکولی گونه های عامل یل شمانی زو جلدی در شهرستان سبزوار". مجله دانشکده پزشکی دانشگاه علوم پزشکی مشهد, 53, 3, 1389, 138-144. doi: 10.22038/mjms.2010.5376
مهاجری, مسعود, شمسیان, سید علی اکبر, رضایی, عبدالرحیم, حسن پور, کاظم, شاکری, محمد تقی, فرنوش, غلامرضا, فتحی مقدم, فرهاد. (1389). 'شناسایی مولکولی گونه های عامل یل شمانی زو جلدی در شهرستان سبزوار', مجله دانشکده پزشکی دانشگاه علوم پزشکی مشهد, 53(3), pp. 138-144. doi: 10.22038/mjms.2010.5376
مهاجری, مسعود, شمسیان, سید علی اکبر, رضایی, عبدالرحیم, حسن پور, کاظم, شاکری, محمد تقی, فرنوش, غلامرضا, فتحی مقدم, فرهاد. شناسایی مولکولی گونه های عامل یل شمانی زو جلدی در شهرستان سبزوار. مجله دانشکده پزشکی دانشگاه علوم پزشکی مشهد, 1389; 53(3): 138-144. doi: 10.22038/mjms.2010.5376
شناسایی مولکولی گونه های عامل یل شمانی زو جلدی در شهرستان سبزوار
1دانشیار گروه انگل شناسی و قارچ شناسی ، دانشگاه علوم پزشکی مشهد، مشهد، ایران
2استادیار جهاد دانشگاهی مشهد ، مشهد، ایران
3استادیار گروه ویروس شناسی دانشگاه علوم پزشکی مشهد، مشهد، ایران
4متخصص کودکان
5دانشیار گروه پزشکی اجتماعی دانشگاه علوم پزشکی مشهد، مشهد، ایران
6کارشناس ارشد انگل شناسی
7-7 مشهد، ایران
چکیده
مقدمه لیشمانیازیس جلدی یک عفونت انگلی است که به عنوان یک مشکل بهداشتی در بخشهایی از ایران بویژه شهرستان سبزوار در استان خراسان رضوی محسوب می شود. مخازن بیماری در دو فرم خشک و مرطوب متفاوت است ، لذا جهت مبارزه با این بیماری تعیین گونه انگل لازم است.DNA هر انگل همانند سایر موجودات زنده ویژه همان انگل است، لذا می توان با استفاده از آن اقدام به تعیین گونه نمود . در این مطالعه با استفاده از تکنیک PCR گونه های انگل عامل لیشمانیازیس جلدی مشخص شده است . روش کار این مطالعه توصیفی مقطعی در سال 1387-1386 در شهرستان سبزوار انجام شده است . نمونه تهیه شده از زخم 86 بیمار که با استفاده از روش لام مستقیم وجود انگل در آنها تایید شده بود، در محیطهای کشت NNN و سپس RPMI-1640 کشت داده شد. پس از کشت انبوه و استخراج DNA با استفاده از 4 روش مختلف استخراج DNA با استفاده از یک جفت پرایمر اقدام به انبوه سازی DNA کینتوپلاست انگل شد. الگوی الکتروفوروزی هر نمونه با گونه های استاندارد لیشمانیا تروپیکا و لیشمانیا ماژور مقایسه شد . از نرم افزار SPSS برای تجزیه تحلیل اطلاعات استفاده شد، همچنین آزمون های آماری تی، کای اسکوئر و من ویتینی مورد استفاده قرار گرف .ت ن تایج روش جوشاندن نمی تواند روش مناسبی جهت استخراج DNA از پروماستیگوتهای لیشمانیازیس جلدی باشد. اما ارزش روش های بر پایه فنل - کلروفرم معادل کیت کیاژن است. نتایج حاصل از الگوهای PCR حاکی از آن بود که دو نوع انگل لیشمانیا تروپیکا(32 مورد) و لیشمانیا ماژور(54) عامل لیشمانیازیس جلدی در شهرستان سبزوار می باشند. نتیجه گیری بر خلاف مطالعات سالهای گذشته در شهرستان سبزوار هر دو نوع انگل لیشمانیا تروپیکا و لیشمانیا ماژور وجود دارند. ضمن اینکه روشهای بر پایه فنل-کلروفرم روشهای مناسبی جهت استخراج DNA پاز روماستیگوتهای انگل لیشمانیا بوده و PCR نیز تکنیک ارزشمندی جهت تعیین گونه انگل در مطالعات اپیدمیولوژیک می باشد
Evaluation of Mulecular Epidemiology of Cutaneous Leishmaniasis In Sabzevar
نویسندگان [English]
Masoud Mohajery1؛ Seyad Aliakbar Shamsian2؛ Abdolrahim rezaee3؛ Kazem Hasan Poor4؛ Mohammad taghi Shakeri5؛ Gholamreza Farnoosh6؛ Farhad Fathi Moghadam7
1Associate Professor, Parasitology & Medical Mycology Department, Mashhad University of Medical Sciences, Mashhad, Iran
2Assistant Professor, Iranian Academic Center of Education, Culture& Research, Mashhad Branch
3Assistant Professor, Virology Mashhad University of Medical Sciences, Mashhad, Iran
4Specialist In Pediatric Medicine
5Associate Professor of Social Medicine,University of Medical Sciences, Mashhad, Iran
6Master Of Science In Parasitology
7Research Instructor, Iranian Academic Center of Education, Culture& Research, Mashhad Branch
چکیده [English]
Introduction Cutaneous leishmaniasis is a parasitic infection With an important health problem in many parts of Iran such as Sabzevar, in Khorasan Razavi province. Epidemiological and clinical findings aren’t sufficient for identification of parasites. Because the host sources are different an accurate identification and diagnosis is necessary before treatment. DNA of every parasite such as every organism is specific. This facilitates extensive use of DNA for diagnostic and identification of parasite species. Molecular methods such as PCR seem to be very useful for this reason. We decided to identify different species of leishmania parasites causing Cutaneous leishmaniasis by PCR in Sabzevar Materials and Methods A Total of 86 patients, whom diseases were confirmed by direct smear, were recruited and samples were isolated and cultured in NNN medium, followed by sub-cultured in RPMI-1640. Then DNA was extracted using four DNA extraction methods. Extracted kinetoplastic DNA was amplified by PCR method using two specific primers. Electrophoresis patterns from each isolate were compared with reference strains of L.major, L.tropica and the marker Results The related bands to amplified products were detected on agarose gel in all samples expected of DNA extracted by boiling method. The results of kDNA gene templets in Electrophoresis gel indicated the leishmania parasite species, causing Cutaneous leishmaniasis, in Sabzevar as 32 samples L.tropica and 54 samples L.major. Conclusion L.tropica and L.major both are Etiologic agents ofCutaneous leishmaniasis in Sabzevar and PCR technique is a suitable tool for the leishmania species characterization in epidemiological studies. The phenol-chloroform based methods are as valuable as DNeasy mini kit (QIAGEN) but more cost effective than kit.
ابتدای صفحه