@article { author = {Kazemi, Abdolhasan and Robson, Jefri and Denning, Deivid and Zarei MahmoudAbadi, Ali and Jafari, Abbasali}, title = {Molecular Detection of Phospholipase B3 as an Effective Factor in Virulence of Aspergillus Fumigatus}, journal = {medical journal of mashhad university of medical sciences}, volume = {53}, number = {4}, pages = {199-205}, year = {2010}, publisher = {}, issn = {1735-4013}, eissn = {2008-2673}, doi = {10.22038/mjms.2010.5365}, abstract = {Introduction Phospholipases are the major component of all eukaryotic bilayer cell membranes. and serve as a scaffold for membranes proteins. Phospholipases are a class of ubiquitous enzymes that have estrase activity and due to their ability to lyses of cell membrane can play an important role for pathogenicity of microrganisims. During this study using degenerate primers based on homologous amino acid sequences of some fungi phospholipase B (PLB), detection of Aspergillus fumigatusPLB3 was carried out. Materials and Methods After DNA extraction of A. fumigatus, A. niger, Fusarium venonatum and Aurobasidiumpullulans PCR reaction was carried out using degenerate primers. Predicted 2100 bp product from A. fumigatus was cloned in pGEMT-Easy vector and then transformed into E. coli Top 10 F’ competent cell for extraction of cloned DNA fragment. Result Sequence analysis of 2100 bp fragments using BLASTX software were revealed a high homology to published PLB sequences from other fungi. Conclusion Phylogenic tree analysis of PLB3 gene shows that PLB and potential PLB analogues like lysophospholipase are contained in a large cluster of the PLB family. A. fumigatus PLB gene is more closely related to A. oryzae, A. niger, Penicillium chrysogenum and Neurospora crassa than other fungi. Also, sequence availability of full length PLB3 gene represents a noteworthy breakthrough in the study of this opportunistic pathogen and function of PLB3 gene in pathogenesis of A. fumigates. Detection of PLB3 gene can be lead to preparing vaccine, blocker and laboratory marker for recognition of PLB3 gene products either in patient body or clinical samples.}, keywords = {Aspergillus fumigates,Phospholipase B3,Virulence}, title_fa = {شناسایی مولکولی فسفولیپاز B3 به عنوان عامل موثر در بیماری زایی آسپرژیلوس فومیگاتوس}, abstract_fa = {مقدمه فسفولیپدها یکی از ترکیبات اصلی غشا سیتوپلاسمی سلول های یوکاریوتی می باشند. فسفولیپازها نیز آنزیم هایی هستند که در همه سلول های یوکاریوت وجود دارند و با توجه به وجود فسفولیپدها در غشا سیتوپلاسمی یوکاریوت ها روشن است که قدرت تخریب غشا سیتوپلاسمی به وسیله این آنزیم ها می تواند نقش مهمی در بیماری زایی میکروارگانیسم ها داشته باشد. با توجه به موضوعات فوق، در این تحقیق کلونینگ و تعیین توالی ژن فسفولیپاز B3 در آسپرژیلوس فومیگاتوس انجام پذیرفت. روش کار این مطالعه توصیفی در مرکز تحقیقات بیوتکنولوژی دانشگاه علوم پزشکی تبریز در سال 1389-1387 انجام شده است. DNA ژنومی قارچ های آسپرژیلوس فومیگاتوس، آ. نیجر، کاندیدا آلبیکانس، اورئوبازیدیوم پولولنس و فوزاریومونوناتوماستخراج ومتعاقب تکثیرقطعه مورد نظربا PCR، محصو.ل PCR به حامل pGEMT-Easy vector پیوند زده شد و به سلول میزبان ('E.coli Top 10 F) ترانسفورم گردید. نتایج مقایسه همسانی توالی نوکئوتیدی نوکئوتیدی و اسید امینه ای سـکوانس نوکلئوتیـدی ژن plb3 بـه دسـت آمـده بـه طـول bp 2028، همسانی بسیار بالایی با توالی نوکلئوتیدهای نوکلئوتیدهای ژن های مشابه در سایر قارچ ها نشان می دهد. نتیجه گیری آنالیز درخت فیلوژنیک ژن plb3 نشان می دهد که این ژن با گروه بزرگی از ژن های مشابه در سایر میکروارگانیسم ها ارتباط دارد و مقایسه همسانی توالی این ژن با ژن مشابه در قارچ های دیگر، نشان دهنده همسانی زیاد توالی این ژن با ژن های PLB در سایر قارچ ها است. مطالعات مربوط به تعیین توالی ژن هایی که عملکرد آنها در بیماریزایی میکروارگانیسم ها موثر می باشند، عمدتا به منظور استنباط اطلاعات برای ارائه شیوة مصونیت بخشی، تهیه واکسن، طراحی دارو، تهیه بلوکر برای خود ژن و یا محصول ژن و استفاده از آن ها به عنوان معرف آزمایشگاهی وجود عفونت انحام می گیرد.}, keywords_fa = {بیماری زایی,میکروارگانیسم ها,فسفولیپاز B3}, url = {https://mjms.mums.ac.ir/article_5365.html}, eprint = {https://mjms.mums.ac.ir/article_5365_753ac7595366eb4476e29f0e99dbba2d.pdf} }